نبدا بي حاجة بتجي كتير في
الامتحان:
Aims of fixation:
اهداف الfixation:
1. To stop autolysis and putrefaction.
1. بوقف التحلل الذاتي والتعفن البكتيري.
2. To coagulate the tissue; to prevent the loss of easily diffusible substances. (e.g. glycogen).
2. بجلط النسيج, و بمنع فقدان المواد البتتسرب من الخلية. (زي الglycogen).
3. To fortify the tissue against the harmful effects of the tissue processing.
3. بقوي النسيج وبقلل الاثار الاضارة البعملها الtissue processing.
4. To leave the tissue in a condition which facilitates differential staining.
4. بخلي النسيج في حالة بتسهل صبغه.
(لو السؤال ده جا في short notes, دي الاجابة المثالية. من Carliton).
اهم fixatives هي:
1- Formaldehyde. (formalin).
2- Gluteraldehyde.
3- Mercuric Chloride.
4- Potassium dichromate.
5- Chromic acid.
6- Picric acid.
7- Osmium tetroxide (Osmic acid).
8- Glacial acidic acid.
9- Ethanol.
نعرف عن كل ديل معلومات معينة بتورينا خصايص كل واحد فيهم وهل هو محبذ ولا لا. ولو هو مستخدم, مستخدم وين.
1. Formaldehyde( formalin):
Aims of fixation:
اهداف الfixation:
1. To stop autolysis and putrefaction.
1. بوقف التحلل الذاتي والتعفن البكتيري.
2. To coagulate the tissue; to prevent the loss of easily diffusible substances. (e.g. glycogen).
2. بجلط النسيج, و بمنع فقدان المواد البتتسرب من الخلية. (زي الglycogen).
3. To fortify the tissue against the harmful effects of the tissue processing.
3. بقوي النسيج وبقلل الاثار الاضارة البعملها الtissue processing.
4. To leave the tissue in a condition which facilitates differential staining.
4. بخلي النسيج في حالة بتسهل صبغه.
(لو السؤال ده جا في short notes, دي الاجابة المثالية. من Carliton).
اهم fixatives هي:
1- Formaldehyde. (formalin).
2- Gluteraldehyde.
3- Mercuric Chloride.
4- Potassium dichromate.
5- Chromic acid.
6- Picric acid.
7- Osmium tetroxide (Osmic acid).
8- Glacial acidic acid.
9- Ethanol.
نعرف عن كل ديل معلومات معينة بتورينا خصايص كل واحد فيهم وهل هو محبذ ولا لا. ولو هو مستخدم, مستخدم وين.
1. Formaldehyde( formalin):
اسمه التجاري formaldehyde 40% او الفورمالين.
(40% هي نسبة ذوبانه في المويه. (اظن ده جا سؤال مرة.)
- فيو 10% - 40% methanol كمادة مثبتة. Stabilizer.
- its solution, when concentrated or stored becomes acid (formic acid.)
- لو محلول الفورمالين بقي مركز او اتخزن لفترة, ببقي حمض : وببقي اسمه "حمض الفورميك.
بنرجعه لي محلول متعادل بي كم طريقة:
- Formalin should be neutralized by:
1. Diluting it.
1. نخففه.
2. Standing it over magnesium or calcium carbonate.
2. نعرضه لي كربونات المغنيزيوم او الكالسيوم.
3. Adding buffer salts.
نضيف ملح منظم. Buffer salt.
تنبيه: معالجة الفورمالين الحمضي (حمض الفورميك) بي كربونات المغنيزيوم او الكالسيوم بتسبب انفجار explosion...( عشان كده نستخدم نظارات وقفازات واقية ونضيف كربونات المغنيزيوم او الكالسيوم علي اناء الفورمالين وهو مايل (by layering).)
- The concentrated solution of formalin, becomes turbid when stored for too long. Forming “paraformaldehyde” which is less strong but is usable if turbidity is removed with filtration.
- محلول الفورمالين المركز بكوّن عكارة لمن يتخزن لفترة طويلة.
وببقي ما فعال زي الاول لاكين لسه ممكن يستخدم اذا اتصفي.
- Formalin should be colorless.
Yellow solution indicates contamination with ferric iron (when stored on metal containers.). Iron-containing formalin may impede diagnosis.
- الفورمالين لازم يكون شفاف. لو ظهر لون اصفر, ده معناها اتلوث بي حديد. (لمن يتخزن في اوعية معدنية.). الفورمالين الفيو حديد بمنع التشخيص بعدين.
- Formalin is unsuitable for use as a concentrated solution. It should be diluted with:
- الفورمالين المركز ما ينفع نشتغل بيو. مفروض نخففه بي:
1. Tap water.
1.مويه الماسورة العادية.
2. Normal saline.
2.محلول السالين العادي. (محلول ملحي.)
3. Buffer salts.
3. املاح منظمة.
(المحلول البنخففه بيو لازم يحتوي علي 10% كحول )
- Formalin gives off an unpleasant vapor that causes irritation to the eyes & respiratory system, so it should be used in a well-ventilated area.
- الفورمالين بطلع بخار بسبب حساسية للعين وبضر الجهاز التنفسي, عشان كده لازم نستخدمه في غرفة جيدة التهوية.
(نقطة سؤال في الامتحان.)
- It may also cause dermatitis. (prevented by wearing gloves.)
- وبسبب التهاب في الجلد. (بنمنع الحاجة دي بانو نلبس قفازات.)
- Formalin hardens but does not shrink the tissue (shrinkage is produced when tissues are subjected to paraffin-embedding.)
- الفورمالين ببقي النسيج يابس لاكين ما ببقي منكمش. (الانكماش بحصل من التشريب باالشمع paraffin-embedding.)
- After formalin fixation, tissue containing blood may show an artifact pigment (formalin pigment).
- بعد استخدام الفورمالين كـfixative, لو العينة لسه فيها باقي دم, بتتكون لينا مادة هي عبارة عن صبغة الفورمالين.
Formalin pigment:
is a brown granular material extracellular & birefringent.
- صبغة الفورمالين هي مادة بنية, حبيبية بتتكوّن بره الخلية وبتغير لون بعض الصبغ. (لازم نتجنبها او نتخلص منها.) (دايما بجي عنها سؤال.)
-It is found commonly in tissues obtained post-mortem.
- بتتكوّن لو النسيج اتحصل عليو post-mortem. (بعد الموت = متأخر شويه).
- It is caused by the action of acid formalin on blood and is avoided by using neutral buffered solution.
- سببها تفاعل الفورماين لمن يبقي حمضي مع الدم. ممكن تجنبها باستخدام الفورمالين مع محاليل منظمة متعادلة neutral buffered solutions.
- May be removed from sections by treatment with a saturated alcoholic solution of picric acid for about 20 minutes.
- يكمن التخلص منها باضافة محلول حمض البكريك الكحولي المشبع saturated alcoholic picric acid لمدة 20 دقيقة تقريبا.
(مرة جا سؤال "ضع دائرة":
- Which of the following is used to treat the formation of formalin pigment?
# saturated alcoholic picric acid.
2. Glutaraldehyde:
-Is the standard fixative for electron microscopy.
- الglutaraldehyde هو الfixative المثالي للمايكروسكوب الالكتروني.
(سؤال مضمون في الامتحان)
“The ideal fixative for electron microscopy is?:”
- Used as a primary fixative followed by secondary fixation in Osmium tetroxide.
- الغلترالدهيد بيستخدم كمثبت اولي (primary fixative) بعديو بنستخدم الOmsium tetroxide.
(اظن المعلومة دي برضو جات في الامتحان:
What is the secondary fixative used after Glutaraldehyde?
او
about Glutaraldehyde:
وواحد من الاجابات بيكون:
- Is a primary fixative followed by secondary fixation in Osmium tetroxide.
- (like formalin), has the disadvantage of poor penetration into larger pieces of tissue.
- الغلترالدهيد بشبه الفورمالين في انو ما بتغلغل في النسيج اذا كان حجم العينة كبير.
- More costly than formalin.
- الغلترالدهيد اغلي من الفورمالين.
3. Mercuric chloride.
:3. كلوريد الزئبق
- A white crystalline substance, soluble in water at room temperature(~7%) and in alcohol (33%).
- مادة كريستالية لونها ابيض, بتذوب في المويه بنسبة 7% تقريبا وبتذوب في الكحول بنسبة 33%.
- Poisonous and corrosive to metals.
- مادة سامة وبتسبب تأكل للمعادن.
- Metal instruments for handling tissues should be protected by dipping them into hot paraffin wax.
-لمن نستخدم كلوريد الزئبق, لازم المواد المعدنية الحتحتك (الملقط البنمسك بيو النسيج) لازم نحميو بي انو نغمسه في شمع برافين سخن.
- Is a powerful protein precipitant and penetrates and hardens the tissue quickly.
- مرسب فعّال للبروتين, بتغلغل وبيبس النسيج بسرعة.
- Shrinks but does not distort the tissue and fixes both the nucleus and cytoplasm, favoring the staining of both components.
- بقلّص النسيج بدون ما يشوهو. بثبت النواة والسايتوبلازم بتاع الخلايا وبي كده بحسن صبغهم الاتنين.
-Used in junction to other fixatives .e.g.
-بيستخدم مع fixatives تانية زي
-Formalin.
-Potassium dichromate.
- Acetic acid.
- Produces Mercury Pigment which is:
a black to brown granular deposit.
-بيكوّن صبغة الزئبق: وهي مادة حبيبية لونها اسود مايل للبني.
(ما مفروض الfixative يكوّن صبغة. لأنو حيصعب التشخيص خالص بعدين. او حيظهر حاجة ما من النسيج .)
-Mercury pigment is soluble in alcoholic iodine and does not affect subsequent staining after removal.
-صبغة الزئبق بتذوب في الايودين الكحولي وما بتأثر علي الصبغ بعدين اذا شلناها. المهم لازم نشيلها قبل الstaining.
-The pigment is removed by being converted by iodine into mercuric iodide which is soluble in alcohol.
- الصبغ بتتزال بي انو الايودين بحولها لي ايوديد الزئبق mercuric iodide البذوب في الكحول.
4. ثاني كرومات البوتاسيوم 4. Potassium dichromate
- مادة كريستالية برتقالية بنستخدمها ك محلول 2,5 -5 % منها مذابة في مويه.
- Acts like chromic acid, both nucleus & cytoplasm are precipitated with destruction of mitochondria.
- طريقة شغله نفس طريق الchromic acid, برسب النواة والسايتوبلازم وبحطم المايتوكوندريا.
-Tissues fixed in potassium dichromate should be washed in running water before proceeding to alcohol to prevent the formation of an insoluble precipitate.
- الانسجة البنثبتها في potassium dichromate لازم نغسلها في مويه جاريه عشان نمنع تكون راسب غير قابل للذوبان (بخرب كل الشغل.) (النقطة دي جات مرة في امتحان.)
(نركز من حسه, اي fixative عندو pigment غالبا حيجي عنو سؤال.)
5- حمض الكروميك chromic acid:
- Prepared by dissolving the dark red crystals of anhydrous (CrO3 = chromium trioxide) in distilled water.
- متكون من كريستالات ثالت اكسيد الكروم (لونها احمر قاتم) مذابة في مويه مقطرة.
- Precipitates proteins and fixes carbohydrates.
-برسب البروتينات وبثبت الكاربوهيدريتات (الاتنين مكونين مهمين شديد لتشخيص امراض معينة. وبتفقدوا من الخلية post-mortem بعد موتها).
(حنشوف سنة تالتة الكلام ده.)
- Is a powerful oxidizing agent. So, it should not be mixed with alcohol or formalin.
- حمض الكروميك عامل مؤكسد قوي عشان كده نتجنب خلطه مع الكحول او الفورمالين. (حتتكون مواد تانية ما عازينها. ونحنا في الهستوباثولوجي بنركز شديد علي المواد البنضيفها للانسجة عشان لو ظهرت مواد عندها الوان بتخرب كل شي)
- عشان كده:
- After fixation in chromic acid, tissues should be washed in running water before treatment with alcohol to prevent formation of an insoluble precipitate in the tissues.
- بعد الfixation بالchromic acid, نغسل الانسجه في مويه جاريه قبل معالجتها بالكحول عشان نمنع تكون رواسب غير قابلة للذوبان (ما ممكن التخلص منها).
6- حامض البكريك picric acid:
- Bright yellow crystalline substance, usually supplied damped with water due to it explosive properties if heated.
- مادة كريستالية لونها اصفر فاتح بتجي مرطبة بي مويه لانو ممكن تنفجر اا كان جافه واتعرضت للحرارة. (النقطة دي جات في الامتحان كتير!.)
- Precipitates nucleoprotein & causes much shrinkage but little hardening.
- بتقلص النسيج شديد بدون ما تبقي يابس.
- It enhances results with cytoplasmic stains & is a useful component of fixatives for glycogen.
- بتحسن نتائج الصبغ ومكون مهم من مكونات الfixatives المستخدمة مع الجلايكوجين (الجلايكوجين مهم لتشخيص بعض الامراض).
7- رابع اكسيد الاوزميوم 7- Osmium tetroxide :
- Supplied as pale yellow crystals in sealed tubes.
- بجي كمادة كريستالية لونها اصفر باهت في انابيب مقفولة.
- Is an expensive chemical.
- مادة كيميائية غالية.
- Vapor from crystals & solutions is irritant and dangerous.
- الكريستالات والمحاليل بتاعتو بطلّع بخار بعمل حساسية و يعتبر خطير.
- If Osmium tetroxide is exposed to light, warmth or organic matter, it is reduced to grey or black lower oxide.
- اذا الOsmium tetroxide اتعرّض للضو, للحرارة (اذا اتخزن في غرفة دافية) او لي مادة عضوية, بحصل ليو اختزال كيميائي ببقي لونه رمادي او اسود.
( مش قبل شويه قلنا ما دايرين لون يظهر من ماف؟ طيب نعمل شنو؟)
- ممكن نمنع الاختزال reduction ده بسهولة باضافة:
# a few drops of saturated aqueous mercuric chloride.
- قطرات بسيطة من محلول كلوريد الزئبق المشبع.
- Used as a fixative for lipids (which are blackened by its reduction to lower oxides).
(1% acid alcohol removes it).
- بيستخدم كfixative للlipids (الlipids بتستخدم لتشخيص امراض كتيرة). لون الlipids ببقي اسود باختزال الosmium tetroxide لي lower oxides.
- اضافة 1% كحول حمضي بتشيل السواد.
- Is used for electron microscopy.
- بيستخدم لو نستعمل مايكروسكوب الكتروني.
(سؤال: الfixative المثالي للelectron microscope هو شنو؟)
8- حامض الخليك "الجليدي": 8- Glacial acetic acid
- Is the pure acetic acid.
- هو حمض الخليك لمن يكون نقي.
- Called “glacial” for it solidifies at ~17oC if water-free.
-(دي بتجي في الامتحان): سموهو "جليدي: من جليد" لانه بتصلب في درجة حرارة 17 مئوية اذا كان خالي من المويه.
- Used in many fixing mixtures to complement the action of other ingredients.
- بيستخدم مع fixatives تانية عشان يعوض عن خاصية محتاجينها لاكين ما في في الfixatives التانية دي.
- It swells collagen fibers, precipitates nucleoprotein & dissolves some cytoplasmic granules.
- ببقي الياف الكولاجين collagen fibers (وهي مكونات في بعض الانسجة بتشخّص بيها بعض الامراض) شكلها اتخن. (وبي كده بسّهل التعرف عليها), برسب البروتين داخل النواة, وبذوّب بعض حبيبات النواة.
9- ايثيل الكحول:ethyl alcohol
- زي ما زكرنا قبل كده, "ايثيل الكحول" او "الايثانول" اسمين لي حاجو زاحدة.
- Is a colorless inflammable liquid.
- سائل شفاف قابل للاشتعال. (لو موقد بنزين في اللاب نبعدو منو.)
- Is a powerful dehydrating agent.
-عامل مجفّف قوي.
- Causes shrinkage and hardening.
- بسبب انكماش وتصلّب الانسجة.
- It coagulates protein but NOT nucleoprotein.
- بجلّط البروتين لاكين ما بجلّط بروتين النواة.
- Precipitates glycogen & dissolves many lipids.
- برسّب الجلايكوجين وبذوّب انوع كتيرة من الدهون.
- ملحوظة:
- لمن تُذكر معلومة انو الfixative الفلاني بعمل كده للمكوّن الفلاني في الخلية, ده عشان مثلا لو في مرض معيّن بصيب الدهون (شكلها بختلف) ما نستخدم fixative بذوّب الدهون. والا حنعرف كيف لو الدهون شكلها ما طبيعي ونقدر نشخّص المرض؟ مرات برضو في fixative ببقي لون مكوّن معيّن من مكونات النسيج عندو لون او شكل معين. ده ببقي المكون ده اوضح ولو هو الحاجة البنفحصها, كده اسهل. فبنستخدمه.
# دي تقريبا اهم الfixatives المستخدمة. بس ممكن نستخدم كم fixative مع بعض عشان كلو واحد بكمّل عيب التاني. اذا في زول استخدم كم fixative مع بعض والتركيبة بتاعتو نجحت, بسمّو التركيبة علي اسمه.
مثال: Gram stain. “Gram” ده اسم الزول الاول مرة استخدم التركيبة.
تعالوا نشوف الcompound fixatives في المقال التانية: كم عددهم وشنو هم وخصايصهم شنو.
(40% هي نسبة ذوبانه في المويه. (اظن ده جا سؤال مرة.)
- فيو 10% - 40% methanol كمادة مثبتة. Stabilizer.
- its solution, when concentrated or stored becomes acid (formic acid.)
- لو محلول الفورمالين بقي مركز او اتخزن لفترة, ببقي حمض : وببقي اسمه "حمض الفورميك.
بنرجعه لي محلول متعادل بي كم طريقة:
- Formalin should be neutralized by:
1. Diluting it.
1. نخففه.
2. Standing it over magnesium or calcium carbonate.
2. نعرضه لي كربونات المغنيزيوم او الكالسيوم.
3. Adding buffer salts.
نضيف ملح منظم. Buffer salt.
تنبيه: معالجة الفورمالين الحمضي (حمض الفورميك) بي كربونات المغنيزيوم او الكالسيوم بتسبب انفجار explosion...( عشان كده نستخدم نظارات وقفازات واقية ونضيف كربونات المغنيزيوم او الكالسيوم علي اناء الفورمالين وهو مايل (by layering).)
- The concentrated solution of formalin, becomes turbid when stored for too long. Forming “paraformaldehyde” which is less strong but is usable if turbidity is removed with filtration.
- محلول الفورمالين المركز بكوّن عكارة لمن يتخزن لفترة طويلة.
وببقي ما فعال زي الاول لاكين لسه ممكن يستخدم اذا اتصفي.
- Formalin should be colorless.
Yellow solution indicates contamination with ferric iron (when stored on metal containers.). Iron-containing formalin may impede diagnosis.
- الفورمالين لازم يكون شفاف. لو ظهر لون اصفر, ده معناها اتلوث بي حديد. (لمن يتخزن في اوعية معدنية.). الفورمالين الفيو حديد بمنع التشخيص بعدين.
- Formalin is unsuitable for use as a concentrated solution. It should be diluted with:
- الفورمالين المركز ما ينفع نشتغل بيو. مفروض نخففه بي:
1. Tap water.
1.مويه الماسورة العادية.
2. Normal saline.
2.محلول السالين العادي. (محلول ملحي.)
3. Buffer salts.
3. املاح منظمة.
(المحلول البنخففه بيو لازم يحتوي علي 10% كحول )
- Formalin gives off an unpleasant vapor that causes irritation to the eyes & respiratory system, so it should be used in a well-ventilated area.
- الفورمالين بطلع بخار بسبب حساسية للعين وبضر الجهاز التنفسي, عشان كده لازم نستخدمه في غرفة جيدة التهوية.
(نقطة سؤال في الامتحان.)
- It may also cause dermatitis. (prevented by wearing gloves.)
- وبسبب التهاب في الجلد. (بنمنع الحاجة دي بانو نلبس قفازات.)
- Formalin hardens but does not shrink the tissue (shrinkage is produced when tissues are subjected to paraffin-embedding.)
- الفورمالين ببقي النسيج يابس لاكين ما ببقي منكمش. (الانكماش بحصل من التشريب باالشمع paraffin-embedding.)
- After formalin fixation, tissue containing blood may show an artifact pigment (formalin pigment).
- بعد استخدام الفورمالين كـfixative, لو العينة لسه فيها باقي دم, بتتكون لينا مادة هي عبارة عن صبغة الفورمالين.
Formalin pigment:
is a brown granular material extracellular & birefringent.
- صبغة الفورمالين هي مادة بنية, حبيبية بتتكوّن بره الخلية وبتغير لون بعض الصبغ. (لازم نتجنبها او نتخلص منها.) (دايما بجي عنها سؤال.)
-It is found commonly in tissues obtained post-mortem.
- بتتكوّن لو النسيج اتحصل عليو post-mortem. (بعد الموت = متأخر شويه).
- It is caused by the action of acid formalin on blood and is avoided by using neutral buffered solution.
- سببها تفاعل الفورماين لمن يبقي حمضي مع الدم. ممكن تجنبها باستخدام الفورمالين مع محاليل منظمة متعادلة neutral buffered solutions.
- May be removed from sections by treatment with a saturated alcoholic solution of picric acid for about 20 minutes.
- يكمن التخلص منها باضافة محلول حمض البكريك الكحولي المشبع saturated alcoholic picric acid لمدة 20 دقيقة تقريبا.
(مرة جا سؤال "ضع دائرة":
- Which of the following is used to treat the formation of formalin pigment?
# saturated alcoholic picric acid.
2. Glutaraldehyde:
-Is the standard fixative for electron microscopy.
- الglutaraldehyde هو الfixative المثالي للمايكروسكوب الالكتروني.
(سؤال مضمون في الامتحان)
“The ideal fixative for electron microscopy is?:”
- Used as a primary fixative followed by secondary fixation in Osmium tetroxide.
- الغلترالدهيد بيستخدم كمثبت اولي (primary fixative) بعديو بنستخدم الOmsium tetroxide.
(اظن المعلومة دي برضو جات في الامتحان:
What is the secondary fixative used after Glutaraldehyde?
او
about Glutaraldehyde:
وواحد من الاجابات بيكون:
- Is a primary fixative followed by secondary fixation in Osmium tetroxide.
- (like formalin), has the disadvantage of poor penetration into larger pieces of tissue.
- الغلترالدهيد بشبه الفورمالين في انو ما بتغلغل في النسيج اذا كان حجم العينة كبير.
- More costly than formalin.
- الغلترالدهيد اغلي من الفورمالين.
3. Mercuric chloride.
:3. كلوريد الزئبق
- A white crystalline substance, soluble in water at room temperature(~7%) and in alcohol (33%).
- مادة كريستالية لونها ابيض, بتذوب في المويه بنسبة 7% تقريبا وبتذوب في الكحول بنسبة 33%.
- Poisonous and corrosive to metals.
- مادة سامة وبتسبب تأكل للمعادن.
- Metal instruments for handling tissues should be protected by dipping them into hot paraffin wax.
-لمن نستخدم كلوريد الزئبق, لازم المواد المعدنية الحتحتك (الملقط البنمسك بيو النسيج) لازم نحميو بي انو نغمسه في شمع برافين سخن.
- Is a powerful protein precipitant and penetrates and hardens the tissue quickly.
- مرسب فعّال للبروتين, بتغلغل وبيبس النسيج بسرعة.
- Shrinks but does not distort the tissue and fixes both the nucleus and cytoplasm, favoring the staining of both components.
- بقلّص النسيج بدون ما يشوهو. بثبت النواة والسايتوبلازم بتاع الخلايا وبي كده بحسن صبغهم الاتنين.
-Used in junction to other fixatives .e.g.
-بيستخدم مع fixatives تانية زي
-Formalin.
-Potassium dichromate.
- Acetic acid.
- Produces Mercury Pigment which is:
a black to brown granular deposit.
-بيكوّن صبغة الزئبق: وهي مادة حبيبية لونها اسود مايل للبني.
(ما مفروض الfixative يكوّن صبغة. لأنو حيصعب التشخيص خالص بعدين. او حيظهر حاجة ما من النسيج .)
-Mercury pigment is soluble in alcoholic iodine and does not affect subsequent staining after removal.
-صبغة الزئبق بتذوب في الايودين الكحولي وما بتأثر علي الصبغ بعدين اذا شلناها. المهم لازم نشيلها قبل الstaining.
-The pigment is removed by being converted by iodine into mercuric iodide which is soluble in alcohol.
- الصبغ بتتزال بي انو الايودين بحولها لي ايوديد الزئبق mercuric iodide البذوب في الكحول.
4. ثاني كرومات البوتاسيوم 4. Potassium dichromate
- مادة كريستالية برتقالية بنستخدمها ك محلول 2,5 -5 % منها مذابة في مويه.
- Acts like chromic acid, both nucleus & cytoplasm are precipitated with destruction of mitochondria.
- طريقة شغله نفس طريق الchromic acid, برسب النواة والسايتوبلازم وبحطم المايتوكوندريا.
-Tissues fixed in potassium dichromate should be washed in running water before proceeding to alcohol to prevent the formation of an insoluble precipitate.
- الانسجة البنثبتها في potassium dichromate لازم نغسلها في مويه جاريه عشان نمنع تكون راسب غير قابل للذوبان (بخرب كل الشغل.) (النقطة دي جات مرة في امتحان.)
(نركز من حسه, اي fixative عندو pigment غالبا حيجي عنو سؤال.)
5- حمض الكروميك chromic acid:
- Prepared by dissolving the dark red crystals of anhydrous (CrO3 = chromium trioxide) in distilled water.
- متكون من كريستالات ثالت اكسيد الكروم (لونها احمر قاتم) مذابة في مويه مقطرة.
- Precipitates proteins and fixes carbohydrates.
-برسب البروتينات وبثبت الكاربوهيدريتات (الاتنين مكونين مهمين شديد لتشخيص امراض معينة. وبتفقدوا من الخلية post-mortem بعد موتها).
(حنشوف سنة تالتة الكلام ده.)
- Is a powerful oxidizing agent. So, it should not be mixed with alcohol or formalin.
- حمض الكروميك عامل مؤكسد قوي عشان كده نتجنب خلطه مع الكحول او الفورمالين. (حتتكون مواد تانية ما عازينها. ونحنا في الهستوباثولوجي بنركز شديد علي المواد البنضيفها للانسجة عشان لو ظهرت مواد عندها الوان بتخرب كل شي)
- عشان كده:
- After fixation in chromic acid, tissues should be washed in running water before treatment with alcohol to prevent formation of an insoluble precipitate in the tissues.
- بعد الfixation بالchromic acid, نغسل الانسجه في مويه جاريه قبل معالجتها بالكحول عشان نمنع تكون رواسب غير قابلة للذوبان (ما ممكن التخلص منها).
6- حامض البكريك picric acid:
- Bright yellow crystalline substance, usually supplied damped with water due to it explosive properties if heated.
- مادة كريستالية لونها اصفر فاتح بتجي مرطبة بي مويه لانو ممكن تنفجر اا كان جافه واتعرضت للحرارة. (النقطة دي جات في الامتحان كتير!.)
- Precipitates nucleoprotein & causes much shrinkage but little hardening.
- بتقلص النسيج شديد بدون ما تبقي يابس.
- It enhances results with cytoplasmic stains & is a useful component of fixatives for glycogen.
- بتحسن نتائج الصبغ ومكون مهم من مكونات الfixatives المستخدمة مع الجلايكوجين (الجلايكوجين مهم لتشخيص بعض الامراض).
7- رابع اكسيد الاوزميوم 7- Osmium tetroxide :
- Supplied as pale yellow crystals in sealed tubes.
- بجي كمادة كريستالية لونها اصفر باهت في انابيب مقفولة.
- Is an expensive chemical.
- مادة كيميائية غالية.
- Vapor from crystals & solutions is irritant and dangerous.
- الكريستالات والمحاليل بتاعتو بطلّع بخار بعمل حساسية و يعتبر خطير.
- If Osmium tetroxide is exposed to light, warmth or organic matter, it is reduced to grey or black lower oxide.
- اذا الOsmium tetroxide اتعرّض للضو, للحرارة (اذا اتخزن في غرفة دافية) او لي مادة عضوية, بحصل ليو اختزال كيميائي ببقي لونه رمادي او اسود.
( مش قبل شويه قلنا ما دايرين لون يظهر من ماف؟ طيب نعمل شنو؟)
- ممكن نمنع الاختزال reduction ده بسهولة باضافة:
# a few drops of saturated aqueous mercuric chloride.
- قطرات بسيطة من محلول كلوريد الزئبق المشبع.
- Used as a fixative for lipids (which are blackened by its reduction to lower oxides).
(1% acid alcohol removes it).
- بيستخدم كfixative للlipids (الlipids بتستخدم لتشخيص امراض كتيرة). لون الlipids ببقي اسود باختزال الosmium tetroxide لي lower oxides.
- اضافة 1% كحول حمضي بتشيل السواد.
- Is used for electron microscopy.
- بيستخدم لو نستعمل مايكروسكوب الكتروني.
(سؤال: الfixative المثالي للelectron microscope هو شنو؟)
8- حامض الخليك "الجليدي": 8- Glacial acetic acid
- Is the pure acetic acid.
- هو حمض الخليك لمن يكون نقي.
- Called “glacial” for it solidifies at ~17oC if water-free.
-(دي بتجي في الامتحان): سموهو "جليدي: من جليد" لانه بتصلب في درجة حرارة 17 مئوية اذا كان خالي من المويه.
- Used in many fixing mixtures to complement the action of other ingredients.
- بيستخدم مع fixatives تانية عشان يعوض عن خاصية محتاجينها لاكين ما في في الfixatives التانية دي.
- It swells collagen fibers, precipitates nucleoprotein & dissolves some cytoplasmic granules.
- ببقي الياف الكولاجين collagen fibers (وهي مكونات في بعض الانسجة بتشخّص بيها بعض الامراض) شكلها اتخن. (وبي كده بسّهل التعرف عليها), برسب البروتين داخل النواة, وبذوّب بعض حبيبات النواة.
9- ايثيل الكحول:ethyl alcohol
- زي ما زكرنا قبل كده, "ايثيل الكحول" او "الايثانول" اسمين لي حاجو زاحدة.
- Is a colorless inflammable liquid.
- سائل شفاف قابل للاشتعال. (لو موقد بنزين في اللاب نبعدو منو.)
- Is a powerful dehydrating agent.
-عامل مجفّف قوي.
- Causes shrinkage and hardening.
- بسبب انكماش وتصلّب الانسجة.
- It coagulates protein but NOT nucleoprotein.
- بجلّط البروتين لاكين ما بجلّط بروتين النواة.
- Precipitates glycogen & dissolves many lipids.
- برسّب الجلايكوجين وبذوّب انوع كتيرة من الدهون.
- ملحوظة:
- لمن تُذكر معلومة انو الfixative الفلاني بعمل كده للمكوّن الفلاني في الخلية, ده عشان مثلا لو في مرض معيّن بصيب الدهون (شكلها بختلف) ما نستخدم fixative بذوّب الدهون. والا حنعرف كيف لو الدهون شكلها ما طبيعي ونقدر نشخّص المرض؟ مرات برضو في fixative ببقي لون مكوّن معيّن من مكونات النسيج عندو لون او شكل معين. ده ببقي المكون ده اوضح ولو هو الحاجة البنفحصها, كده اسهل. فبنستخدمه.
# دي تقريبا اهم الfixatives المستخدمة. بس ممكن نستخدم كم fixative مع بعض عشان كلو واحد بكمّل عيب التاني. اذا في زول استخدم كم fixative مع بعض والتركيبة بتاعتو نجحت, بسمّو التركيبة علي اسمه.
مثال: Gram stain. “Gram” ده اسم الزول الاول مرة استخدم التركيبة.
تعالوا نشوف الcompound fixatives في المقال التانية: كم عددهم وشنو هم وخصايصهم شنو.
No comments:
Post a Comment